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| 环境和谐型绿色农药成为当代农药发展的必然趋势,从天然化合物中筛选农药活性物质或农药先导化合物是绿色农药研发的重要途径之一。本研究以能够引起番茄灰霉病的灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)的一个菌株BC-4为试材,对灰葡萄孢代谢产物中的除草活性物质进行了纯化和结构研究,结果如下: ①灰葡萄孢BC-4菌株在距离30W的紫外灯下30cm处照射60min可发生变异,通过单孢子分离得到36个菌株,其生长情况和产生有除草作用代谢物的水平不同,其中以菌株7-3产生的代谢产物除草效果最佳。通过对菌株7-3产生除草代谢产物条件的摸索,发现在改良PD液体培养基,初始pH值为4.0,黑暗静止的培养条件下,18～28℃程序升温培养18d就可以达到除草代谢物质的产生高峰。 ②将菌株7-3的培养滤液经过冷冻干燥,溶媒萃取,不同溶剂转溶等手段,提取出了具有一定选择性除草作用的组分,对稗草、狗尾草、虎尾草、牛筋草、播娘蒿、荠菜、拟南芥菜活性较强,致死率达80%,对反枝苋、马齿苋、藜作用一般,致死率在40%左右;活性组分可以在番茄、黄瓜、高粱植株的叶片上产生大面积的枯斑,而对小麦、玉米、棉花基本无危...
1 引言8-13 2 材料和方法13-23 2．1 材料13-14 2．1．1 供试菌株13 2．1．2 供试植物13 2．1．3 供试培养基13-14 2．1．4 试剂及主要仪器14 2．2 方法14-23 2．2．1 菌株的紫外诱变14-15 2．2．2 除草活性测定方法15-16 2．2．3 高除草活性变异菌株的筛选16-17 2．2．4 除草活性物质产生条件的优化17-18 2．2．5 病菌培养滤液中除草活性物质的提取18-19 2．2．6 除草活性组分的分离与纯化19-20 2．2．7 除草活性组分的结构研究20-21 2．2．8 除草活性物质对热的稳定性21 2．2．9 除草活性与光照的关系21-22 2．2．10 剂型的初步探索22-23 3 结果与分析23-50 3．1 灰葡萄抱菌株的诱变23 3．2 除草活性物质高产菌株的筛选23-25 3．3 除草活性物质产生条件的优化25-28 3．3．1 培养基种类及培养方式25-26 3．3．2 初始pH值对除草活性物质产生的影响26 3．3．3 除草活性物质产生的高峰期26-28 3．3．4 培养温度的选择28 3．4 除草活性组分的分离提取28-34 3．4．1 冷冻干燥法28 3．4．2 溶媒萃取法28-29 3．4．3 不同pH值萃取29-30 3．4．4 活性炭吸附30-31 3．4．5 除草活性物质提取条件的优化31-32 3．4．6 提取各组分的活性测定32-34 3．5 除草活性组分的分离纯化与结构鉴定34-47 3．5．1 TLC分析34 3．5．2 CC分析34-36 3．5．3 HPLC分析36-42 3．5．4 LC制备与活性测定42-44 3．5．5 组分432的结构分析44-47 3．6 组分432对热的稳定性47 3．7 除草活性与光照的关系47-49 3．8 剂型的研制与除草活性49-50 4 讨论50-53 4．1 微生物代谢产物与生物除草剂开发50-51 4．2 微生物源除草剂剂型的研制与生物安全性51-52 4．3 微生物生物除草剂的开发方向52-53 5 结论53-54 |
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