对本实验室保藏的高天冬氨酸转氨酶活力的重组大肠杆菌E. coli SW0209-52进行了细胞固定化方法、条件、固定化细胞填充床反应器连续转化，转化液中的L-苯丙氨酸提取的研究并且进行了整个过程原材料成本的初步估算。 确定了卡拉胶包埋与0.05%的戊二醛后处理结合的固定化方法，卡拉胶浓度2.5%，菌体量7.5%，得到的固定化细胞酶活回收率为73%。考察了固定化细胞转化过程中各个因素的影响，确定了最适的转化条件pH为8.0、温度为37℃，确定了最适磷酸吡哆醛（PLP）浓度为100μmol/L。细胞经固定化后操作稳定性与贮存稳定性较游离菌显著提高。比较了PLP与维生素B_6作为天冬氨酸转氨酶辅酶的效果，由于维生素B_6在ATP的作用下可以转化成为磷酸吡哆醛，所以维生素B_6在一定程度上可以替代PLP，但是以维生素B_6作为辅酶时固定化细胞的稳定性与PLP为辅酶时固定化细胞的稳定性相比较差。 通过考察高径比对连续反应的影响，选择高径比为13.3的填充柱组成固定化细胞填充床反应器进行L-苯丙氨酸连续转化的研究。分别考察了底物浓度和停留时间对连续转化的影响，综合考虑底物转化率和体积产率，确定了...
中文摘要5-6
ABSTRACT6-7
第一章 绪论7-21
    1.1 L-苯丙氨酸的概况7-11
        1.1.1 L-苯丙氨酸的理化性质7
        1.1.2 用途及市场概况7-8
        1.1.3 国内外苯丙氨酸生产技术发展概况8-11
        1.1.4 本实验室研究情况11
    1.2 固定化细胞技术11-14
        1.2.1 概述11
        1.2.2 固定化细胞的制备方法11-13
        1.2.3 固定化方法的选择13
        1.2.4 L-苯丙氨酸生产菌的固定化研究概况13-14
    1.3 固定化细胞生物反应器14-15
        1.3.1 概述14
        1.3.2 固定化细胞常用的生物反应器14-15
        1.3.3 固定化细胞生物反应器的选择15
    1.4 L-苯丙氨酸的分离提取15-17
        1.4.1 离子交换法16
        1.4.2 活性炭吸附16
        1.4.3 络合萃取法16-17
        1.4.4 液膜分离法17
    1.5 本论文的研究意义17-18
    1.6 本课题的主要研究内容18
    参考文献18-21
第二章 固定化细胞转化制备L-苯丙氨酸的研究21-37
    2.1 引言21
    2.2 材料与方法21-24
        2.2.1 试剂与材料21
        2.2.2 仪器设备21
        2.2.3 微生物培养21-22
        2.2.4 细胞固定化方法22-23
        2.2.5 细胞转化方法23
        2.2.6 分析方法23-24
    2.3 结果与讨论24-35
        2.3.1 固定化条件的研究24-27
        2.3.2 固定化细胞性质研究27-33
        2.3.3 固定化细胞的转化时间曲线33-34
        2.3.4 反复分批转化试验34-35
    2.4 本章小结35
    参考文献35-37
第三章 填充床反应器连续转化制备L-苯丙氨酸的研究37-44
    3.1 引言37
    3.2 材料与方法37-39
        3.2.1 试剂与材料37
        3.2.2 仪器设备37-38
        3.2.3 微生物培养38
        3.2.4 细胞固定化方法38
        3.2.5 填充床反应器（PBR）的构建及运转38
        3.2.6 分析方法38-39
    3.3 结果与讨论39-42
        3.3.1 填充床反应器高径比（H/D）的选择39
        3.3.2 停留时间和底物浓度对固定化细胞填充床反应器转化能力的影响39-42
        3.3.3 填充床反应器的操作稳定性研究42
    3.4 本章小结42-43
    参考文献43-44
第四章 L-苯丙氨酸的分离提取44-58
    4.1 引言44
    4.2 材料与方法44-47
        4.2.1 试剂与材料44
        4.2.2 仪器设备44
        4.2.3 微生物培养44-45
        4.2.4 细胞固定化方法45
        4.2.5 固定化细胞转化方法45
        4.2.6 树脂预处理方法45
        4.2.7 操作方法45-46
        4.2.8 分析方法46-47
    4.3 结果与讨论47-56
        4.3.1 树脂的筛选47-48
        4.3.2 树脂吸附交换条件研究48-52
        4.3.3 L-苯丙氨酸的洗脱52-54
        4.3.4 L-苯丙氨酸洗脱液的脱色54
        4.3.5 L-苯丙氨酸的结晶及鉴定54-56
        4.3.6 L-苯丙氨酸提取收率的计算56
    4.4 本章小结56-57
    参考文献57-58
第五章 固定化细胞转化制备L-苯丙氨酸的成本估算58-61
    5.1 引言58
    5.2 成本估算58-60
        5.2.1 以5’-磷酸吡哆醛为辅酶连续生产过程成本估算58-59
        5.2.2 以维生素B_6为辅酶分批转化过程成本估算59-60
    5.3 本章小结60
    参考文献60-61
总结与展望61-63

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