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BL0505、利用猪血制备氯化血红素技术的研究 |
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| 关键词: 猪血,氯化血红素,溶碎,拆分,提取 |
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血红素是血红蛋白的辅基,有极其广泛和重要的应用。当血红素脱离珠蛋白后,亚铁被自动氧化成高铁,因此从猪血中提取的血红素产品一般是氯化高铁血红素。利用猪血制备氯化血红素既充分利用我国丰富的猪血资源;又提供大量氯化血红素产品。本文在比较几种常见制备氯化血红素方法基础上,将惯用一种方法的制备工艺分成三个相对独立的工艺阶段:红血球溶碎、血红素与珠蛋白脱离及提取氯化血红素,分别探讨各阶段优化工艺及相关理论。研究结果如下: A:混合试剂破胞是红血球破胞、溶碎效果最好的方法,最佳工艺参数:乙醇用量是红血球浓缩物体积的25%,氯仿是30%,去离子水是150%,并要求机械搅拌30min。 B:选用柠檬酸作为拆分剂,最佳工艺:pH值对分解反应影响最大,最适pH值2.80;丙酮添加量为红血球浓缩物体积的6倍:1mol/L NaCl添加量为35%;处理8hr。 C:用羧甲基纤维素钠盐作为氯化血红素提取剂,用量为1.5g/100ml红血球浓缩物,提取8hr,pH值调至6.00。结果表明:产物中氯化红血素纯度为5.16%,提取氯化血红素总量达95.1mg/100ml猪血,收率高达31.3%。
摘要9-10
英文摘要(Abstract)10
第一章 综述11-22
1 猪血组成11-12
2 国内外猪血利用动态12-13
3 血红蛋白、血红素及氯化血红素的概述13-17
3.1 血红蛋白、血红素及氯化血红素的分子结构及理化性质13-15
3.2 血红素及其衍生物的应用15-17
3.3 血红素应用趋势17
4 制备氯化血红素的工艺原理17-18
4.1 红血球溶碎释放血红蛋白原理17-18
4.2 拆分血红蛋白原理18
4.3 提取氯化血红素原理18
5 国内外制备氯化血红素的研究进展18-21
5.1 丙酮法19
5.2 冰醋酸法19-20
5.3 酶解法20
5.4 羧甲基纤维素法20
5.5 表面活性剂法20
5.6 酯化--水解法20
5.7 醇法20
5.8 特异选择性溶剂法20-21
6. 本课题的研究目的、意义与研究内容21-22
第二章 不同方法制备氯化血红素的比较研究22-34
前言22
1 材料与方法22-27
1.1 材料22-23
1.1.1 原料与试剂22
1.1.2 设备22-23
1.2 方法23-27
1.2.1 制备氯化血红素方法23-24
1.2.2 产物干燥24
1.2.3 产物鉴定24-25
1.2.4 测定指标25-27
2. 结果与分析27-33
2.1 制备产物干燥前后的感官比较结果与分析28
2.2 制备方法所得产物干燥后感官比较结果与分析28-29
2.3 不同制备方法所得粗品氯化血红素总量比较结果与分析29-30
2.4 不同制备方法所得产物纯度比较结果与分析30-31
2.5 不同制备方法所得氯化血红素收率比较结果与分析31-32
2.6 产物紫外-可见光谱图定性分析与对比结果32-33
3. 讨论33-34
第三章 红血球溶碎释放血红蛋白的处理研究34-47
前言34
1 材料与方法34-40
1.1 材料34-35
1.1.1 原料与试剂34-35
1.1.2 设备35
1.2 方法35-40
1.2.1 红血球溶碎释放血红蛋白操作要点35
1.2.2 猪血预处理35-36
1.2.3 操作流程36-37
1.2.4 试验设计与分组37-39
1.2.5 测定指标39-40
1.2.6 红血球溶碎效果的综合评价方法40
1.2.7 统计分析40
2. 结果与分析40-47
2.1 冷冻破胞效果与混合试剂破胞效果的比较结果与分析40-41
2.2 氯仿添加量对红血球溶碎效果影响结果与分析41-42
2.3 乙醇添加量对红血球溶碎效果影响结果与分析42-43
2.4 去离子水添加量对红血球溶碎效果影响结果与分析43-44
2.5 确定红血球溶碎最佳工艺参数的正交试验结果与分析44-45
2.6 红血球释放血红蛋白量与氯化血红素量间关系的分析45-47
第四章 血红素与珠蛋白分离条件的优化研究47-61
前言47
1 材料与方法47-52
1.1 材料47-48
1.1.1 原料与试剂47
1.1.2 设备47-48
1.2 方法48-52
1.2.1 拆分血红蛋白阶段操作要点48
1.2.2 工艺流程48
1.2.3 试验设计与分组48-51
1.2.4 测定指标51-52
1.2.5 统计分析52
2. 结果与分析52-61
2.1 酸种类对分离珠蛋白与血红素的影响结果与分析52-53
2.2 不同PH值对分离珠蛋白与血红素的影响结果与分析53-55
2.3 NaCl添加量对分离珠蛋白与血红素的影响结果与分析55-56
2.4 处理时间对分离珠蛋白与血红素的影响结果与分析56
2.5 不同丙酮添加量对分离珠蛋白与血红素的影响结果与分析56-57
2.6 确定分离阶段最佳工艺参数的正交试验结果与分析57-61
第五章 氯化血红素提取工序的优化研究61-71
前言61
1 材料与方法61-65
1.1 材料61-62
1.1.1 原料与试剂61
1.1.2 设备61-62
1.2 方法62-65
1.2.1 提取氯化血红素工序操作要点62
1.2.2 回收丙酮62
1.2.3 工艺流程62-63
1.2.4 试验设计与分组63-64
1.2.5 测定指标64-65
2. 结果与分析65-71
2.1 丙酮液中吸附剂种类与剂量对提取效果影响结果与分析65-66
2.2 不同PH值对提取氯化血红素的影响结果与分析66-67
2.3 时间对提取氯化血红素的影响结果与分析67-68
2.4 确定丙酮回收适宜温度的试验结果与分析68
2.5 确定提取氯化血红素最佳工艺参数的正交试验结果与分析68-71
全文总结71-72
创新点72-73
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