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BH0405、大豆提取物中异黄酮成分的分离与纯化 |
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| 关键词: 大豆异黄酮,大孔吸附树脂,制备色谱,微波水解,高效液相色谱法,水提法,分离纯化 |
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大豆异黄酮是大豆中的主要功效成分,具有降胆固醇、抗防骨质疏松、缓解更年期综合症等多种生理活性和药理功效,可广泛应用于药品、保健食品及饮料添加剂中。本文对市售大豆异黄酮提取物中各种异黄酮成分进行进一步分离纯化的工艺方法和条件进行了研究。 1、建立了一种利用大孔吸附树脂分离纯化四种主要的大豆异黄酮的方法。样品采用HPD-100树脂吸附后用20、25、35、45和70%的乙醇溶液梯度洗脱分离四种主要大豆异黄酮。大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素产品纯度分别为49.31、60.38、19.33和8.14%。该方法适用于对四种主要大豆异黄酮成分进行初步分离。 2、建立了一种微波快速水解大豆异黄酮糖苷的方法,探讨了大豆异黄酮微波水解的条件,并对各种条件进行了优化。与传统回流水解方法进行比较,该方法能简单,快速,高效水解大豆异黄酮,运用该方法能快速制备大豆异黄酮苷元。 3、建立了制备型高效液相色谱制备大豆苷元、染料木素单体的方法,对制备流动相配比、流速、样品上样量等制备条件进行了优化。且该方法具有生产周期短、产品质量高、方法简便等特点,产品可作为中药药效物质基础研究中的对照品。 4、建立...
中文摘要3-5
ABSTRACT5-6
第一章 绪论11-26
1.1 大豆异黄酮的结构11-13
1.2 大豆异黄酮的性质13-18
1.2.1 大豆异黄酮的物理性质13-15
1.2.2 大豆异黄酮的化学性质15-18
1.2.2.1 显色反应15-16
1.2.2.2 苷的水解16-18
1.3 大豆异黄酮的提取和分离18-24
1.3.1 大豆异黄酮的提取工艺18-20
1.3.2 大豆异黄酮的分离与纯化20-24
1.3.2.1 大孔吸附树脂分离与纯化大豆异黄酮20-22
1.3.2.3 沉淀法分离大豆异黄酮22-23
1.3.2.4 溶剂法分离大豆异黄酮23
1.3.2.5 色谱法分离大豆异黄酮23-24
1.4 选题的依据和意义24-26
第二章 大孔吸附树脂分离纯化四种主要大豆异黄酮26-36
2.1 前言26-27
2.2 实验部分27-29
2.2.1 仪器、色谱条件、材料和试剂27
2.2.2 大豆异黄酮的检测27-28
2.2.3 大孔吸附树脂前处理和样品上样28
2.2.4 四种大豆异黄酮分离洗脱条件的初步探讨28-29
2.2.5 最大上样量的考察29
2.2.6 洗脱曲线的绘制和洗脱工艺的考察29
2.3 结果与讨论29-35
2.3.1 上样方法的选择29-30
2.3.2 洗脱溶剂的初步选择结果30
2.3.3 最大上样量的选择结果30
2.3.4 洗脱工艺的选择30-35
2.4 结论35-36
第三章 微波法快速水解大豆异黄酮糖苷36-43
3.1 前言36-37
3.2 实验部分37-38
3.2.1 仪器、色谱条件、材料和试剂37
3.2.3 数据处理相关计算公式37-38
3.3 结果与讨论38-42
3.3.1 水解溶剂的选择38-39
3.3.2 最佳微波功率的选择39-40
3.3.3 固液比的优化40
3.3.4 盐酸加入量的优化40
3.3.5 与传统酸回流水解方法比较40-42
3.4 结论42-43
第四章 高效液相色谱法制备大豆素和染料木素43-52
4.1 前言43-44
4.2 仪器与试剂44
4.3 样品的分析和峰确认44-45
4.3.1 分析色谱条件44-45
4.3.2 色谱峰的确认45
4.4 制备条件45-46
4.4.1 样品前处理45
4.4.2 制备色谱条件45-46
4.5 结果与讨论46-51
4.5.1 检测波长的选择46
4.5.2 溶剂的选择46-47
4.5.3 流动相的选择47
4.5.4 最佳进样量的选择47
4.5.5 最佳流速的选择47-48
4.5.6 产品收率分析48
4.5.7 单体纯度的鉴定和光谱波谱分析48-51
4.6 结论51-52
第五章 大豆异黄酮苷和苷元的“绿色”分离方法研究52-65
5.1 前言52-53
5.2 实验部分53-54
5.2.1 仪器、材料和试剂53-54
5.2.2 实验方法54
5.3 结果与讨论54-59
5.3.1 分离溶剂的选择54-55
5.3.2 提取分离温度的选择55
5.3.3 提取分离时间的选择55-56
5.3.4 物料比的优化56-58
5.3.5 工艺的放大及重复性考察58-59
5.4 大豆苷元的制备59-62
5.4.1 不同溶剂的选择59-60
5.4.2 提取液稀释加速沉淀的考察60-62
5.5 结论62-65
参考文献65-76
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