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BH0803、固定化乳杆菌制取甘露醇的工艺研究 |
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| 关键词: 布氏乳杆菌,甘露醇,固定化,固定化细胞,制取 |
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甘露醇是国家基本药物,是医药工业的重要原科,是药品中常用的赋形剂。同时它也是一种重要的精细化工产品,在医药、化工和食品等很多方面具有重要的用途。甘露醇具有一些特殊生理功能,如食用后不引起血糖水平波动、不引起牙齿龋变以及低热值等特性,甘露醇作为甜味剂和食品添加剂的用量在世界范围内迅速增加,甘露醇的市场需求迅速扩大,呈现供不应求的局面。 目前制取甘露醇的传统生产方法一般为天然提取法、化学合成法。天然提取法需消耗大量的海带,同时需要蒸发大量的水,能耗很高,污染重,产品质量也较差。随着海洋资源不断开采,难以保证原材料的供应。化学法转化率低而且副产大量价格低廉的山梨醇(占转化糖的3/4)。而发酵法能够利用酶系统完成立体有择的氢化作用,所得的甘露醇产率高且不产生山梨醇,且反应条件温和,介质纯度要求不高,辅助因子可再生。因此用发酵法生产甘露醇有很大的市场潜力。 本文研究了以布氏乳杆菌发酵制取甘露醇的方法。利用分光光度法测定发酵液中甘露醇和果糖的含量,在540nm处测定果糖的含量,在412nm处测定...
摘要3-4
Abstract4-5
目录6-10
第一章 引言10-25
1.1 甘露醇的应用10-13
1.1.1 甘露醇在医药工业中的应用11-12
1.1.2 甘露醇在化学工业中的应用12-13
1.1.3 甘露醇在食品及日用化学品工业中的应用13
1.2 甘露醇生产工艺的发展及研究现状13-17
1.2.1 提取法制备甘露醇13-14
1.2.2 化学合成法制备甘露醇14-15
1.2.3 生物酶—化学催化剂法制备甘露醇15
1.2.4 微生物发酵法制备甘露醇15-17
1.3 微生物转化甘露醇的机理17-21
1.3.1 同型发酵乳酸菌的代谢机理17-18
1.3.2 异型发酵乳酸菌的代谢机理18-21
1.3.3 同型和异型发酵乳酸菌的代谢机理的不同之处21
1.4 固定化技术概论21-23
1.4.1 固定化酶(细胞)的由来与发展21-22
1.4.2 固定化酶(细胞)的制备方法22-23
1.5 本文的研究意义及研究思路23-25
1.5.1 本文的研究意义23-24
1.5.2 本文的研究内容24-25
第二章 发酵体系分析方法的研究25-34
2.1 材料与方法25-30
2.1.1 实验原理25-26
2.1.2 实验试剂及仪器26-27
2.1.3 溶液的配制27
2.1.4 实验方法27-30
2.2 结果与讨论30-33
2.2.1 DNS法果糖标准曲线的绘制30
2.2.2 脱水后甘露醇标准曲线的绘制30-31
2.2.3 脱水后果糖标准曲线的绘制31
2.2.4 样品中甘露醇含量的计算31-32
2.2.5 脱水处理对甘露醇含量测定的影响32
2.2.6 脱水法与不脱水法的比较32-33
2.3 本章小结33-34
第三章 菌种的性质34-43
3.1 引言34
3.2 材料与方法34-38
3.2.1 试剂及仪器34-35
3.2.2 培养基35
3.2.3 菌体生长量的测定35
3.2.4 菌种的恢复培养35-36
3.2.5 菌种的保藏36
3.2.6 乳杆菌生长曲线绘制的方法36
3.2.7 菌体生长过程中甘露醇含量测定的方法36
3.2.8 菌种的最适生长pH确定的方法36
3.2.9 脱氢酶的最适生长pH值确定的方法36-37
3.2.10 菌种的最适生长温度确定的方法37
3.2.11 脱氢酶的最适生长温度确定的方法37-38
3.3 实验结果与讨论38-42
3.3.1 乳酸菌生长曲线的绘制38
3.3.2 菌体生长过程中甘露醇含量的变化38-39
3.3.3 菌种的最适生长pH39
3.3.4 脱氢酶的最适生长pH值39-40
3.3.5 菌种的最适生长温度40-41
3.3.6 脱氢酶的最适生长温度41-42
3.4 本章小结42-43
第四章 布氏乳杆菌固定化条件的选择43-54
4.1 引言43-44
4.2 实验材料与方法44-48
4.2.1 实验原理44
4.2.2 材料和仪器44-45
4.2.3 菌液的制备45
4.2.4 固定化布氏乳杆菌中甘露醇的测定方法45
4.2.5 最适海藻酸钠浓度选择的方法45-46
4.2.6 测定卡拉胶浓度对固定化影响的方法46
4.2.7 最适CaCl_2浓度选择的方法46
4.2.8 最适交联pH选择的方法46
4.2.9 最适交联温度选择的方法46-47
4.2.10 最适菌体包埋量选择的方法47
4.2.11 固定化条件优化的方法47-48
4.3 结果与讨论48-53
4.3.1 海藻酸钠浓度对布氏乳杆菌固定化的影响48-49
4.3.2 卡拉胶浓度对颗粒机械强度和产甘露醇的影响49-50
4.3.3 CaCl_2浓度对布氏乳杆菌固定化的影响50
4.3.4 交联pH对细胞固定化的影响50-51
4.3.5 交联温度对细胞固定化的影响51
4.3.6 菌体包埋量对细胞固定化的影响51-52
4.3.7 固定化条件的优化52-53
4.4 本章小结53-54
第五章 固定化布氏乳杆菌的性质54-63
5.1 引言54-55
5.2 材料与方法55-58
5.2.1 试剂与仪器55
5.2.2 菌体的培养条件55
5.2.3 固定化方法55-56
5.2.4 甘露醇含量的测定方法56
5.2.5 固定化细胞最适pH值选择的方法56
5.2.6 固定化细胞最适温度选择的方法56
5.2.7 固定化细胞最适底物浓度选择的方法56
5.2.8 固定化细胞最适摇床转速选择的方法56
5.2.9 固定化细胞最适发酵时间选择的方法56
5.2.10 固定化细胞发酵条件优化的方法56-57
5.2.11 固定化细胞的操作稳定性确定的方法57
5.2.12 固定化细胞的储存稳定性确定的方法57-58
5.3 结果与讨论58-62
5.3.1 固定化细胞最适pH值的确定58
5.3.2 固定化细胞最适温度的确定58-59
5.3.3 固定化细胞最适底物浓度的确定59
5.3.4 固定化细胞最适摇床转速的确定59-60
5.3.5 固定化细胞最适发酵时间的确定60
5.3.6 固定化细胞发酵条件的优化60-61
5.3.7 固定化细胞的操作稳定性61
5.3.8 固定化细胞的储存稳定性61-62
5.6 本章小结62-63
第六章 结论63-65
参考文献65-70
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