研究了盐析法、离子交换法提取鸡蛋清溶菌酶的工艺过程,优化了工艺参数。在盐析法中应用热变性技术除去盐析粗品中的杂蛋白,然后结晶得溶菌酶,提取重量收率达0.24%左右,酶活收率61%左右。此法操作简单,收率较高,适于小规模生产。在研究离子交换工艺过程中,发现混合H+型、Na+型的离子交换树脂,可起到调节蛋清pH的作用,不引入其他无机酸碱,减少了工艺过程带来的杂质,不影响剩余蛋清性质,有利于蛋清的综合利用。此法重量收率达0.4%,酶活收率90%左右。研究发现以丙酮为溶剂沉析溶菌酶,可以避免硫酸盐溶液易腐蚀设备、污染环境、生产周期长的缺点。此法溶菌酶重量收率0.41%,酶活收率87%左右,可降低生产成本,提高原料的综合利用率。研究了用乙醇代替丙酮作有机溶剂沉析剂,同时改用氯化钠溶液洗脱溶菌酶的过程。此法溶菌酶重量收率0.41%,酶活收率82%左右。研究了比色法测定溶菌酶酶活力的条件。实验表明,比色法在测定结果重现性上优于比浊法。此法具有简便、直观、专一的特点,适用于溶菌酶生产过程的检测监控。
第一章 文献综述8-29
    1.1 溶菌酶的性质8-9
    1.2 溶菌酶的应用9-11
        1.2.1 在食品工业上的应用9-10
        1.2.2 在酶工程上的应用10
        1.2.3 在发酵工业上的应用10-11
        1.2.4 在医学上的应用11
        1.2.5 在科学研究中的应用11
    1.3 溶菌酶的生产现状11-12
    1.4 溶菌酶的提取方法12-20
        1.4.1 直接结晶法12-13
        1.4.2 亲和色谱法13-15
        1.4.3 离子交换法15-17
        1.4.4 超滤法17-18
        1.4.5 反胶团萃取法18-20
    1.5 蛋清的组成成分20-24
        1.5.1 水分20
        1.5.2 蛋白质20-23
        1.5.3 碳水化合物23
        1.5.4 维生素和色素23
        1.5.5 灰分23
        1.5.6 脂质23-24
        1.5.7 酶24
    1.6 溶菌酶活力的测定方法24-29
第二章 实验材料与方法29-36
    2.1 实验材料29-30
        2.1.1 实验药品29
        2.1.2 实验仪器29-30
    2.2 实验方法30-36
        2.2.1 离子交换树脂的预处理30
        2.2.2 盐析法提取溶菌酶30-31
        2.2.3 离子交换法提取溶菌酶31-32
        2.2.4 蛋白浓度的分析32-33
        2.2.5 溶菌酶酶活力的测定33-34
        2.2.6 比色法测酶活34-36
第三章 盐析法提取溶菌酶的研究36-43
    3.1 盐析条件的研究37-41
        3.1.1 离子强度的影响37-38
        3.1.2 盐析时间的影响38-39
        3.1.3 盐析pH值的影响39-40
        3.1.4 盐析温度的影响40
        3.1.5 粗溶菌酶的分离提纯40-41
    3.2 小结41-43
第四章 离子交换法提取溶菌酶的研究43-56
    4.1 离子交换法提取条件的研究44-54
        4.1.1 树脂吸附溶菌酶的选择性44-45
        4.1.2 树脂的混合比例45
        4.1.3 树脂的用量45-46
        4.1.4 吸附时间46-47
        4.1.5 洗涤次数47-48
        4.1.6 洗脱条件48-50
        4.1.7 盐析浓度50-51
        4.1.8 丙酮沉析条件51-52
        4.1.9 乙醇沉析条件52-54
    4.2 小结54-56
第五章 溶菌酶酶活力测定方法的研究56-61
    5.1 测定酶活条件的研究56-59
        5.1.1 溶菌酶浓度56-57
        5.1.2 RBB标记底物浓度57-58
        5.1.3 时间对酶促反应的影响58
        5.1.4 温度对酶促反应的影响58-59
        5.1.5 底物溶液的稳定性59
    5.2 比色法与比浊法的比较59-60
    5.3 小结60-61
第六章 总结61-63
参考文献63-67

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